De par leur structure particulière, les colonnes puriFlash® Monolith apportent des solutions intéressantes et innovantes aux utilisateurs de colonnes de chromatographie pour la purification.

La purification doit être la plus rapide possible afin de ne pas freiner le processus de production. C’est pourquoi les colonnes puriFlash® Monolith sont indispensables. Elles permettront un gain de temps pour cette étape importante, jusqu’à 80% de temps en moins.

 

Qu’est-ce qu’une colonne puriFlash® Monolith ?

Les colonnes Interchim PuriFlash® monolith sont des colonnes pré-packées avec un gel de silice innovant. Elles vous permettront de réaliser des purifications à très grande vitesse, en générant de faibles contre-pressions.

 

Comment les colonnes puriFlash® monolith peuvent–elles fournir de meilleurs résultats ?

Dans les pores de ce monolithe, on distingue deux structures (Macro et micro pores), qui permettent une diffusion plus rapide et plus profonde du solvant à l’intérieur des particules. Cela conduit à des purifications plus efficaces, en particulier pour les macromolécules comme les peptides avec une pression bien moindre que pour une silice conventionnelle.

Cette structure rend possible le travail à des débits 4 à 5 fois plus important que le débit optimum, et ce avec une perte de résolution bien moindre qu’avec une silice conventionnelle.

 

1. Moins de contre-pression

Gagnez du temps lors de vos purifications en augmentant le débit lors des méthodes !
La perte de résolution sera extrêmement faible.

Exemple d’application :

Dual pore

Silice conventionnelle 15µm

Colonne 25g @ 15mL/min

Application Silice conventionnelle 15µm colonnes puriFlash Monotith

Colonne 25g @ 15mL/min

Flèche Flèche
Application Dual pore colonnes puriFlash Monotith

2 x Colonne 25g @ 15mL/min

Application Silice conventionnelle 15µm colonnes puriFlash Monotith

2 x Colonne 25g @ 15mL/min

Flèche Flèche

Application Dual pore colonnes puriFlash Monotith

2 x Colonne 25g @ 60mL/min

Pression trop importante au débit optimum x 2

Echantillons :
1- GLY-TYR 238
2- VAL-TYR-VAL 380
3- Met-Enkephalin 574
4- Angiotensin 1 000
5- Cytochrome c from bovine heart 11749
Inj. 0.15mL
Gradient: Eau/ACN + 0.1%TFA
5 à 60% en ACN 15mL/min en 33.75min (pour 1 colonne)
15mL/min en 66.5min (pour 2 colonnes)
60mL/min en 16.5min (pour 2 colonnes)
Détection :
215nm
Grace aux caractéristiques de cette phase, la perte de résolution en fonction du débit est bien plus petite que pour une silice conventionnelle !

 

2. Meilleure résolution en Flash

Comparaison avec des colonnes classiques :

Riboflavin Allura red AC Cyanocobalamin
Riboflavin Allura Red AC Cyanocobalamin

Phase Normale

Riboflavin Colonne Phase normale B 20µm Colonne Phase normale Y 25µm Colonne Phase normale G 20um Colonne Phase normale I 15µm
DualPore B 20 µm Y 25 µm G 20 µm I 15 µm

Sample: Allura red AC, brilliant blue FCF, cyanocobalamin and rhodamine B, Eluant: hexane : ethanol = 70 : 30

Phase Inverse

Colonne Phase inverse DualPore Colonne Phase inverse B 20um Colonne Phase inverse Y 40µm Colonne Phase inverse Y 25µm Colonne Phase inverse G 20µm Colonne Phase inverse I 15µm
DualPore B 20 µm Y 40 µm Y 25 µm G 20 µm I 15 µm

Sample: Allura red AC, Fast green FCF, riboflavin and rhodamine B, Eluant: acetonitrile : water = 15 : 85

Comparé à des colonnes avec une silice plus classique, on s’aperçoit que les colonnes remplies avec une phase monolithe présentent une bande de diffusion d’échantillon moins importante.

Si on approfondit la réflexion, il devient plus facile de purifier des composés polaires. En effet, le faible élargissement des bandes de composés permet une meilleure séparation pour les composés de temps de rétention proche.

β-carotene Brilliant Blue FCF Rhodamine B
Beta carotene Brilliant Blue FCF Rhodamine B
DualPore Flash B 20 µm I 15 µm
Colonne DualPore FLASH Colonne B 20 µm Colonne I 15 µm
Flèche Flèche Flèche
Colonne Phase inverse B 20um Colonne B 20 µm Colonne I 15 µm

Sample: β-carotene, brilliant blue FCF, and rhodamine B, Hexane : ethanol = 7:3

Application pour la purification de produit naturels

SIL : Spirilloxanthin extracted from Photosynthetic bacteria SIL : Spirilloxanthin extracted from Photosynthetic bacteria ODS: lycopene extracted from tomato paste
SIL : Spirilloxanthin extracted from Photosynthetic bacteria ODS: lycopene extracted from tomato paste

Pour résumer les avantages que vous apporteront les colonnes puriFlash Monolith :

  • Faible contre pression. (on peut envisager d ‘utiliser des solvants générant beaucoup de pression habituellement)
  • Augmente la productivité en utilisant des débits plus élevés lors des purifications.
  • Faible diffusion de l’échantillon dans la colonne, permettant de séparer des composés de temps de rétention proches.

 

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